在文献或共识中，经常看到针对于神经系统自身免疫性疾病检测时，推荐使用 CBA、TBA、ELISA 检测方法或多种方法联合检测阳性率更高，那到底什么是CBA、TBA 和 ELISA 检测呢？
还有，从表面上看，CBA 法的敏感性高特异性好，TBA 法检测价值有限，但事实真是这样吗？
一、CBA、TBA、ELISA 的区别？
1. 细胞免疫双荧光法（CBA）
基于细胞转染的间接免疫荧光法，其作用原理是将抗原基因导入哺乳动物细胞，使细胞大量特异性表达目的抗原，患者标本中的抗体（一抗）与抗原特异性结合，随后利用荧光标记的二抗结合一抗，根据显微镜下观察的荧光情况判读结果。
图：CBA 法作用原理示意图
由于 CBA 法转染表达极大程度上还原了抗原结构，因此其特异性和敏感性均受到认可。但 CBA 法仅能进行单一靶标抗原检测，当临床症状不够典型或临床信息不足时，仅选择检测某一类疾病抗体可能会导致其他抗体漏检。适当增加抗体检测，有利于提高阳性率。
2. 组织免疫荧光法（TBA）
基于组织为基质的间接免疫荧光法，其原理是将动物脑组织切片与患者血清或脑脊液一起处理后加入荧光标记的二抗，与大脑海马及小脑特定细胞或者结构结合的抗体最终均会发出荧光，常用于未知抗体的筛查和已知抗体的组织确认。
由于 TBA 法可提供全抗原谱，通过特异性荧光可检测到未知的神经特异性抗体，适用于所有针对神经元细胞膜及胞内抗原的自身抗体检测。但 TBA 法特异性不够，阳性结果需结合 CBA 法进行抗原种类确认。
根据《中国自身免疫性脑炎诊治专家共识（2022年版）》，自身免疫性脑炎的确诊实验为抗神经细胞抗体阳性，间接免疫荧光法（IIFT）是目前检测自身免疫性脑炎抗神经元表面抗原抗体和部分抗神经突触胞内抗原抗体的主要检测方法，而 IIFT 主要包括的就是 CBA 法和 TBA 法两种。
所以，由于 TBA 检测的必要性和重要性，在自身免疫性脑炎的抗体谱常规检测中，建议还是 TBA 和 CBA 同时检测。同时 TBA 法还可帮助临床发现可能的新抗体。
3. 酶联免疫吸附剂测定（ELISA）
ELISA 竞争法，也被称为 ELISA 阻断法，是 ELISA 技术中最复杂的一种。其原理是将已知的抗原或抗体结合在固相载体表面，然后利用酶标记（偶联）的抗体或抗原与之孵育，样本中的抗原或抗体可竞争性地与固相载体结合，再通过显色剂显色，显色结果深浅与待检抗原或抗体的量成反比。
图：竞争法检测抗体原理示意图
ELISA 竞争法通常用于检测小分子如半抗原、激素、药物等，可检测不纯的样品，数据再现性高，但存在整体敏感性和专一性较差的问题。而 CBA 法敏感性高、稳定性好，能避免酶联免疫放大技术使信号失真导致的假阳性。
二、CBA、TBA、ELISA 怎么选择？
目前，国外常规检测策略是先用 TBA 筛查是否有抗神经元抗体表达，再用 CBA 法鉴定具体抗体。若 CBA、TBA 均阳性，则认为相关抗体阳性。因此在条件允许的情况下，CBA、TBA 同时检测是最佳的，而 ELISA 与 CBA 是相似的，但是 ELISA 更适用于定量检测。
当 CBA 检测阴性，而 TBA 显示特异性荧光时，提示存在相关特异性抗体，实验室应及时与临床沟通，增加相关抗体检测。此外，为避免因转染率或平台稳定性等因素导致的假阳性结果，罕见抗体必须使用 TBA 法进行确认，以免误导临床。
CBA 法与 ELISA 法都是检测分泌到细胞外的游离状态的细胞因子。与 ELISA 法相比，CBA 法一次能同时测定多种细胞因子，而 ELISA 法一次只能测定一种。CBA 法大幅度节省了检测的时间和简化了操作步骤，且所需的样品量较少，但 CBA 法在定量检测方面不如 ELISA 法准确。
即检测单一细胞因子的时候推荐 ELISA 法，多个细胞因子的时候推荐 CBA 法，一片细胞因子的时候推荐 TBA 法。检测方法并无优劣之分，只是哪个检测更加适合这一次的抗体检测。
